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凝胶净化色谱的原理和仪器特点
点击次数:869 发布时间:2022-02-22
凝胶净化色谱是凝胶渗透色谱主要应用的一种,是样品前处理的一种方法。凝胶净化色谱是一种以惰性多孔凝胶为固定相,基于尺寸排阻原理,主要依据分子尺寸大小差异使物质分离的一种高效液相色谱方法。


凝胶净化色谱的分离原理:

一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。

大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。

小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出。

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