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凝胶净化仪包含了凝胶制备和电泳两个步骤
点击次数:55 发布时间:2023-05-17
   凝胶净化是一种常用的蛋白质纯化方法,它能够快速、简便地将目标蛋白质从复杂混合物中分离出来。而凝胶净化仪则是具体实现凝胶净化过程的设备。
 
  一、凝胶净化原理
  凝胶净化是依靠分子量筛选效应来进行蛋白质纯化的。在凝胶中,由于其空间结构和酸碱度等因素的影响,不同大小的蛋白质会在凝胶孔道中移动速度不同,进而实现分离的效果。
 
  二、凝胶净化仪主要由电泳槽、电源、恒温装置和收集系统等部分组成。其中电泳槽是核心的部件,它包含了凝胶制备和电泳两个步骤。
  1.凝胶制备
  凝胶制备通常使用聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶。其中,聚丙烯酰胺凝胶是目前应用广泛的凝胶材料之一。在制备聚丙烯酰胺凝胶时,需要将单体丙烯酰胺、交联剂N,N'-甲撑二丙烯酰胺和过硫酸铵等混合后进行聚合反应。通过控制单体与交联剂的比例和加入过硫酸铵的量等因素,可以调节凝胶孔径和网络结构,从而实现对不同大小蛋白质的筛选分离。
 
  2.电泳
  凝胶制备好后,就可以进行电泳操作了。在电泳过程中,需要将样品溶液注入凝胶上方的样品槽中,并将电极插入两端,接通电源。此时,电场作用下,带电粒子(包括带电的DNA、RNA或蛋白质)会向电极方向移动,根据其大小进行分离。
 
  三、凝胶净化仪的优点:
  (1)具有高效性:能够快速地将目标蛋白质从复杂混合物中分离出来。
 
  (2)灵敏度高:能够检测到非常微小的蛋白质量,并进行准确的分离。
 
  (3)纯度高:能够将目标蛋白质从复杂混合物中高效地纯化出来,并且不会受到其他成分的干扰。
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